| 步骤 | 描述 | 时间 |
 病毒载体共转 |
亚搏app足球常规使用的第二代慢病毒包装系统包括1个转移质粒（Transfer plasmid）、1个 膜蛋白表达质粒（Envelope plasmid）、1个包装质粒（Packaging plasmids）， 将这些质粒共转染包装细胞。1个包装质粒分别为Gag/Pol表达质粒。 |
第1天 |
 收集细胞上清 |
在细胞里，转移质粒转录出携带目的基因（Gene of Interest，简称GOI）的HIVRNA 基因组，与包装质粒表达出的衣壳结构蛋白、酶、调控蛋白组装成病毒颗粒后，转运到 细胞膜内侧，形成包膜病毒分泌到胞外。 膜蛋白质粒表达的VSV-G膜蛋白锚定在细胞膜上，随着病毒成熟，与细胞膜一起成为了 病毒的膜。细胞短暂孵育后，收集上清，离心去除细胞碎片并过滤。 |
第3天 |
 浓缩并纯化 |
PEG浓缩病毒颗粒。对于超纯化慢病毒（体内应用级别）， 采用蔗糖离心方法进一步纯化、浓缩病毒。 |
第4天 |
 质检 |
对病毒进行滴度测定（Titer determination）、微生物检测（Bioburden test， 针对细菌、真菌）、支原体检测（Mycoplasma test）等。若转移载体同时编码一个 荧光蛋白，亚搏app足球还会将病毒进行细胞转导以测定相应的荧光表达情况（Transduction test）。 此外，对于超纯化慢病毒，亚搏app足球还可以检测内毒素水平（Endotoxin test）。 |
第5天 及以后 |
| 定制内容 | 交付周期 | 交付清单 | 常规规格 |
| LV 小量定制（总量1×108 TU，滴度≥1×108 TU/mL） | 3周左右 | LV病毒和质检报告 | 50μl/管 |
| LV 中量定制（总量1×108 TU，滴度≥1×108 TU/mL） | 3周左右 | LV病毒和质检报告 | 50μl/管 |
| LV 大量定制（总量1×108 TU，滴度≥1×108 TU/mL） | 4周左右 | LV病毒和质检报告 | 50μl/管 |
| 病毒表达系统 | 腺病毒ADV | 腺相关病毒载体AAV | 慢病毒LV |
| 病毒基因组 | dsDNA | ssDNA | ssRNA |
| 基因组大小 | 36kb左右 | 4.8kb左右 | 9kb左右 |
| 病毒颗粒直径 | 90-100nm | 20-30nm | 80-100nm |
| 包装/克隆容量 | ≤7.5kb | ≤3kb | ≤4kb |
| 病毒滴度 | 1010-1011pfu/ml | 1012-1014vg/ml | 108-109TU/ml |
| 感染的细胞类型 | 分裂和非分裂细胞 | 分裂不旺盛细胞 | 分裂和非分裂细胞 |
| 表达丰度 | 高水平瞬时表达 | 高水平表达 | 中到高水平表达 |
| 表达时效性 |
短暂 （1-2天开始表达，持续≤2-4周） |
潜在的长久 （7-14天开始表达，持续3-6个月） |
长久 （2-4天开始表达，持续≥6个月） |
| 外源基因整合至宿主基因组 | 非整合 | 非整合 | 整合 |
| 免疫原性 | 较高 | 超低 | 低 |
| 应用 | 细胞/动物较大基因过表达 | 动物实验常用载体；基因治疗药物载体 | 细胞实验常用载体；CAR-T治疗的递送载体 |
| 安全性 | BSL-2 | BSL-1 | BSL-2 |
